保健食品中肌醇的测定 |
| 发布时间：2005-09-13 |
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1 范围
本方法规定了保健食品中肌醇含量的测定方法。
本方法适用于肌醇作为功效成分添加于片剂、胶囊、饮料等试样类型中含量的测定。
本方法的最低检出量为2mg/kg。
本方法的最佳线性范围是0.1～10mgmL。
2 原理
将固体试样提取液或液体试样稀释液浓缩至干，经硅烷化处理，以正己烷提取，气相色谱氢火焰检测器定性定量检测。
3 试剂
（1）无水乙醇：分析纯。
（2）正己烷：分析纯。
（3）无水硫酸钠：分析纯。
（4）三甲基氯硅烷：分析纯。
（5）六甲基二硅氧烷：分析纯。
（6）二甲基甲酰胺 ：分析纯。
（7）乙醇溶液：3mL无水乙醇加水至10mL。
（8）肌醇标准溶液：将肌醇标准品(纯度99％)在100±5℃干燥4h，准确称量0.0500g，溶于乙醇溶液，准确配成100.0mL溶液。此溶液每mL含0.500肌醇。
（9）硅烷化试剂 将三甲基氯硅烷、六甲基二硅氨烷，二甲基甲酰胺以1:2:8的体积比混合制成，临用时现配。
4 仪器和设备
（1）气相色谱仪：附氢火焰检测器（FID）
（2）旋转蒸发仪。
（3）超声波清洗器。
5 分析步骤
（1）试样预处理
5.1.1取20粒片剂或胶囊试样研磨或混匀，称取一定量（准确至0.001g）于试管中，加入乙醇溶液，使浓度为每mL中大约含肌醇0.5mg，超声提取10min, 在转速为3000r.p.m/min下离心5min，上清液待用。液体试样如浓度过高可用乙醇溶液稀释至每毫升含肌醇0.5mg。
5.1.2 准确量取1.0mL试样溶液于旋转蒸发仪浓缩瓶中，加入5mL无水乙醇，于60℃旋转蒸发仪上浓缩至剩有少量液体，之后再每次加入5mL无水乙醇直至浓缩瓶中液体完全除去。
5.1.3向浓缩瓶中准确加入硅烷化试剂5.0mL，使用超声波振超至瓶中内容物完全分散。在70℃水浴中加热10min。冷却后加入10mL水，再准确加入3.0mL正己烷，混摇后放置10min，在转速为3000r.p.m/min下离心5min,取出正己烷层，加入少量无水硫酸钠，轻轻混摇后放置，取上清液进样。
准确量取（3.7）中肌醇标准溶液1.0mL，并按试样5.1.2起操作，可得肌醇标准衍生溶液。
（2） 气象色谱参考条件
5.2.1 检测器：FID
5.2.2 色谱柱：BP25m×0.32mmi.d.石英弹性毛细管柱
5.2.3 气体流速：
载气（N2） 50mL/min
尾吹气（N2） 50mL/min
氢气 40mL/min
空气 500mL/min
分流比 1：50
5.2.4柱温：190℃
5.2.5进样口温度：245℃
5.2.6衰减：4
5.2.7纸速：2
5.2.8色谱分析：量取1µL标准及试样衍生液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。
5.2.9色谱图 在上述色谱条件下，肌醇的保留时间为5.220。
（3）标准曲线制备：配制浓度为0.0、0.1、0.5、2.5、5.0、10.0mg/mL肌醇标准溶液，在给定的仪器条件下进行气相色谱分析，以峰高或峰面积对浓度作校正曲线。
（4）分析结果表示
5.4.1计算公式
h1×C×V×100
X＝ ——————
h2×m
式中：
X-试样中肌醇的含量，mg/100g(mL)；
h1-试样峰高或峰面积;
C-标准溶液浓度，mg/mL；
V-试样定容体积，mL；
H2-标准溶液峰高或峰面积；
m-试样量，g或mL。
5.4.2结果表示：检测结果保留三位有效数字。
6 技术参数
准确度：方法的添加回收率在91.0％～97.2％之间。
允许差：平行样测定相对误差≤±10％。 |
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